elisa靠洗滌來達(dá)到分離游離的和結(jié)合的酶標(biāo)記物的目的。通過洗滌以清除殘留在板孔中沒能與固相抗原或抗體結(jié)合的物質(zhì),以及在反應(yīng)過程中非特異性地吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。今天通蔚生物科技為大家總結(jié)小鼠elisa試劑盒洗滌的兩大方法。
小鼠elisa試劑盒洗滌方法:
一、浸泡式
1、吸干或甩干孔內(nèi)反應(yīng)液;
2、用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去);
3、浸泡,即將洗滌液注滿板孔,放置1-2分鐘,間歇搖動(dòng),浸泡時(shí)間不可隨意縮短;
4、吸干孔內(nèi)液體。吸干應(yīng)徹底,可用水泵或真空泵抽吸,也可甩去液體后在清潔毛巾或吸水紙上拍干;
5、重復(fù)操作3和4,洗滌3-4次(或按說明規(guī)定)。在間接法中如本底較高,可增加洗滌次數(shù)或延長浸泡時(shí)間。
二、流水沖洗式
初用于小珠載體的洗滌,洗滌液僅為蒸餾水甚至可用自來水。洗滌時(shí)附接一特殊裝置,使小珠在流水沖擊下不斷地滾動(dòng)淋洗,持續(xù)沖洗2分鐘后,吸干液體,再用蒸餾水浸泡2分鐘,吸干即可。
浸泡式猶如盆浴,流水沖洗式則好比淋浴,其洗滌效果更為徹底,且也簡便、快速。已有實(shí)驗(yàn)表明,流水沖洗式同樣也適用于微量滴定板的洗滌。洗滌時(shí)設(shè)法加大水流量或加大水壓,讓水流沖擊板孔表面,洗滌效果更佳。
除了洗滌方式,還有主洗滌參數(shù)、洗滌次數(shù)等在實(shí)驗(yàn)中也是至關(guān)重要的。