酶聯(lián)免疫試劑盒是酶免疫測(cè)定技術(shù)中應(yīng)用很廣的技術(shù)。聯(lián)免疫檢測(cè)試劑盒(ELISAkit)是一種快速、方便、準(zhǔn)確的檢測(cè)樣品中靶蛋白的研究工具,被用于許多重要的研究領(lǐng)域,包括癌癥、心血管、細(xì)胞生物學(xué)、表觀遺傳學(xué)、新陳代謝、免疫學(xué)、神經(jīng)科學(xué)、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)等。
其基本方法是將已知的抗原或抗體吸附在固相載體(聚苯乙烯微量反應(yīng)板)表面,使酶標(biāo)記的抗原抗體反應(yīng)在固相表面進(jìn)行,用洗滌法將液相中的游離成分洗除。常用的ELISA(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn))法有雙抗體夾心法和間接法,前者用于檢測(cè)大分子抗原,后者用于測(cè)定特異抗體。
酶聯(lián)免疫試劑盒操作注意事項(xiàng):
1、試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
2、實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
3、不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
4、使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器。
5、使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
6、洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
7、底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立
即讀取OD值。
8、加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
9、按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。