ELISA試劑盒具有敏感性高,特異性強(qiáng),快速等特色,真菌毒素殘留檢測。但該辦法從加樣、洗板、顯色到讀數(shù)步驟繁多,其間任何一步操控欠好都或許影響檢測成果的準(zhǔn)確性。因而,在實(shí)際測定操作中一定要留意以下幾點(diǎn)。
一、溫度
1.試劑盒回溫
大多數(shù)ELISA檢測試劑盒為冷藏(2℃-8℃)保存。從冰箱拿出來后,先不要急于翻開試劑盒,要等試劑盒的溫度平衡至室溫且試劑盒盒表面無冷凝水。檢測所用的試劑需充分混勻且*溶解后再用。
提早1~2小時取出試劑盒,放在室溫中;或在預(yù)設(shè)25℃恒溫培養(yǎng)箱中平衡30分鐘~60分鐘。
2.環(huán)境溫度的操控
ELISA試劑盒可采用以下辦法操控溫度:
1)試驗(yàn)室應(yīng)配備溫濕度表,且確保定時計(jì)量。
2)依據(jù)天氣情況設(shè)定試驗(yàn)室空調(diào)制冷或加溫功能,待室溫安穩(wěn)且無攪擾的條件下再開端檢測流程。
3)選用帶溫控設(shè)備的孵育儀器,如恒溫孵育器、恒溫培養(yǎng)箱、多功能酶標(biāo)儀等。留意要提早敞開預(yù)熱。
3.孵育
孵育時要確保溫度均勻,防止蒸發(fā)變干。孵育時運(yùn)用封板膜,并置于暗處孵育。多塊板一起試驗(yàn)時,要平放各板,不要疊放,避免溫度擴(kuò)散的不均勻性或邊緣效應(yīng)。
二 、加樣
1.加樣要快速準(zhǔn)確,時刻宜操控在15分鐘內(nèi)。
2.如樣品量較大,可分次完成試驗(yàn),或?qū)y樣液置于預(yù)混微孔板中運(yùn)用多通道移液器快速移取。
3.汲取同一試劑,可將試劑倒入V型加樣槽中,運(yùn)用多通道移液器快速移取。
三、剩余ELISA試劑盒的妥善保存
試劑盒康復(fù)至室溫后,取出要運(yùn)用的酶標(biāo)板孔,未運(yùn)用的酶標(biāo)板孔應(yīng)及時放回鋁箔袋,加入干燥劑,封緊封口,2℃-8℃冷藏保存。
切忌將未*平衡至室溫的酶標(biāo)板放回鋁箔袋,因?yàn)榇丝桃驗(yàn)闇囟炔?,酶?biāo)板上會有水汽,不利于安穩(wěn)保存。
大多數(shù)試劑盒加樣后反應(yīng)時刻較短,環(huán)境溫度對檢測成果會有很大影響,所以操控好環(huán)境溫度是確保試劑盒檢測成果有用的重要因素。
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