現(xiàn)市場中的試劑盒數(shù)不勝數(shù),質(zhì)量也是參差不齊,訂購ELISA試劑盒現(xiàn)貨不能盲目下單。? 我們知道,ELISA方法試劑盒的有敏感性高、特異性強、重復(fù)性好的優(yōu)點,但是您真的確定自己購買的試劑盒產(chǎn)品具備這些優(yōu)點嗎?
一、根據(jù)個人愛好
一般ELISA檢測的是酶促反應(yīng)的可溶性產(chǎn)物,抗體上結(jié)合有相應(yīng)的酶,而反應(yīng)體系中添加有相應(yīng)的底物。這種酶促反應(yīng)生成具有特征性的顏色,可以通過分光光度計進(jìn)行檢測,堿性磷酸酶AP也是一種常用酶。酶可以結(jié)合在一抗上,也可以結(jié)合在二抗上,還可以使用鏈霉親和素標(biāo)記的酶與親和素標(biāo)記的一抗結(jié)合。此外elisa的結(jié)果檢測還包括放射性檢測、熒光檢測、化學(xué)發(fā)光或顯色法檢測等。
單克隆抗體和多克隆抗體都能夠用于ELISA試劑盒,實際上有時候二者結(jié)合效果更好。
二、根據(jù)ELISA類型
雖然elisa方法試劑盒有著多種類型,不過它們都有一個共同特點,就是進(jìn)行抗原捕獲。一般捕獲形式包括將抗原吸附到微孔板或者用微孔板上的抗體進(jìn)行捕獲。In-cell ELISA和酶聯(lián)免疫斑點ELISPOT是兩種特殊的類型,In-cell ELISA需要將微孔板中培養(yǎng)的細(xì)胞進(jìn)行固定和通透化,然后再用抗體原位檢測。
ELISPOT有點像蛋白印跡Western blot,先在帶膜的微孔板中培養(yǎng)細(xì)胞,然后在膜上檢測細(xì)胞分泌的抗原形成斑點。此外,我們還需要根據(jù)自身需要選擇96孔板或是384孔板進(jìn)行ELISA實驗。
如果抗體間發(fā)生沖突或交叉反應(yīng)就會影響整個實驗的特異性。其中抗體來源所帶來的兼容性就是交叉反應(yīng)的一個因素。盡管現(xiàn)在購買源自動物的抗體越來越容易,我們?nèi)杂斜匾_認(rèn)一下是否會產(chǎn)生交叉反應(yīng)的問題。在用雙抗夾心法進(jìn)行ELISA檢測時,檢測用的二抗必須特異性針對檢測一抗,而不能與捕獲抗體起反應(yīng)。如果檢測用二抗與捕獲抗體結(jié)合,實驗特異性就會大打折扣。通常我們選用源自不同宿主的捕獲抗體和檢測一抗,來避免上述問題。
以上兩點針對產(chǎn)品的自身條件,其次大家在購買的時候還要看elisa試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)商,比如索要三證、咨詢技術(shù)等方式,從而進(jìn)一步了解供應(yīng)商的可靠性。
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